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TEM測試如何低速離心取材以及送樣方法?
來源:測試GO 時間:2022-09-16 14:51:47 瀏覽:2658次

在我們進(jìn)行TEM測試時,低速離心取材以及送樣是實驗的重要的一部分,下面教大家一個所有類型均適用的細(xì)胞樣品操作方法:

動物組織的TEM圖

1. 最好刮取細(xì)胞,收集在離心管中,1500 rpm離心5 ~ 10 min(初次離心參數(shù)可按自己的經(jīng)驗調(diào)整,目的是不損傷細(xì)胞結(jié)構(gòu)的情況下去掉培養(yǎng)液成分)。

2. 棄上清,加入常溫(平時固定液4℃保存,臨用前拿出復(fù)溫到室溫或體溫)的3%戊二醛固定液,重懸細(xì)胞。常溫固定2 min。

3. 轉(zhuǎn)移至1.5 ml尖底EP管,2000 rpm離心10 min。此步離心后,細(xì)胞應(yīng)為約半顆綠豆大小。

4. 用吸管小心棄上清,加入室溫的0.1M PB或等滲PBS,重懸細(xì)胞。再以1000 rpm離心5 ~10 min。

5. 以相同條件重復(fù)上述重懸、離心步驟,再次漂洗細(xì)胞(不要偷懶,要洗第二遍)。

6. 用吸管小心棄上清,加入預(yù)熱到40℃GT2(實驗室提供的特殊固定液)專用溶液重懸細(xì)胞(輕輕搖勻或吹吸均可,不要有肉眼可見的大塊);立即以3000 rpm離心10 min。

7. 用吸管盡快小心棄上清;然后密閉管蓋,轉(zhuǎn)入4℃靜置10 min(嚴(yán)禁結(jié)冰)。

8. 沿管壁緩慢加入固定液,不要沖擊細(xì)胞團(tuán),靜置30 min后可送樣。

重點:

1)固定和各項操作都是室溫條件,GT2(實驗室提供的特殊固定液)本身要預(yù)熱到40℃,GT2凝結(jié)前沒有需要預(yù)冷的步驟。

2)取材完成后,在4℃保存,保存和運輸期間嚴(yán)禁結(jié)冰(太靠近冰箱后壁或冰袋運輸都可能使樣品結(jié)冰。冬季寧可常溫送樣)。

3)觀察細(xì)胞連接的實驗,嚴(yán)禁用消化的方法收集細(xì)胞。


測試狗

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全部 3小時前 四川
文字是人類用符號記錄表達(dá)信息以傳之久遠(yuǎn)的方式和工具?,F(xiàn)代文字大多是記錄語言的工具。人類往往先有口頭的語言后產(chǎn)生書面文字,很多小語種,有語言但沒有文字。文字的不同體現(xiàn)了國家和民族的書面表達(dá)的方式和思維不同。文字使人類進(jìn)入有歷史記錄的文明社會。
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